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該系統(tǒng)的主要影響因素是因在蛋白上引入標(biāo)記物可導(dǎo)致蛋白生物活性改變，因為標(biāo)記的結(jié)果，本質(zhì)上是制造了一個由目的蛋白和標(biāo)記物氨基酸序列融合而成新的蛋白。因此，使用該技術(shù)時，應(yīng)該認識到是研究新的蛋白特性，而不是研究蛋白的原來特性。但實踐經(jīng)驗表明這并不成為很大的問題，通過標(biāo)記蛋白獲得的信息可以采用針對原始未標(biāo)記蛋白的抗體證實。第二方面的主要影響因素是在進行表位標(biāo)記時，許多目前使用的標(biāo)記物是由已知的蛋白（如myc基因產(chǎn)品）片段組成。這意味著抗標(biāo)記物抗體不僅識別被研究的標(biāo)記蛋白，同時還可能...
將抗原結(jié)合到抗體微珠基質(zhì)上的zui簡單方法是將微珠裝到一個層析柱內(nèi)，將抗原溶液流經(jīng)層析柱，當(dāng)抗原流經(jīng)層析柱時結(jié)合到抗體上而被固定，直到洗脫時才洗脫下來。這種方法的效率是根據(jù)抗原與固定的抗體之間的接觸時間決定的，所以抗原抗體之間的作用時間可以用低流速而延長。這種方法zui大一個問題就是某些蛋白非特異性結(jié)合到分離柱上，這些蛋白可以出現(xiàn)在洗脫液中，從而使純化效率降低?；|(zhì)本身和抗體基質(zhì)復(fù)合物具有與待檢抗原溶液中蛋白質(zhì)非特異性結(jié)合的表面活性。雖然這些反應(yīng)較正常的抗原—抗體反應(yīng)要弱得多...
淋巴細胞脈絡(luò)叢腦膜炎（1ymphocyticchoriomeningitis）是由淋巴細胞脈絡(luò)叢腦膜炎病毒引起的急性傳染病。臨床表現(xiàn)多樣，典型表現(xiàn)為急性無菌性腦膜炎，嚴重者可出現(xiàn)腦膜腦炎。該病一般為自限性，預(yù)后良好。[病因?qū)W]淋巴細胞脈絡(luò)叢腦膜炎病毒屬沙粒病毒屬，為RNA病毒，是zui早發(fā)現(xiàn)與人類無菌性腦膜炎相關(guān)的病毒之一。病毒先侵入呼吸道上皮細胞繁殖，然后進入血液循環(huán)致病毒血癥，此期可通過血腦脊液屏障而致腦膜、脈絡(luò)叢有淋巴細胞及單核細胞浸潤，腦實質(zhì)水腫等病變。[實驗室診斷]...
狂犬?。╮abies）是狂犬病毒引起的傳染病。犬、貓、狼是狂犬病毒的主要儲存宿主。人被病犬（或病貓等）咬傷后，病畜唾液中的病毒經(jīng)傷口侵入人體，沿周圍神經(jīng)（主要是感覺神經(jīng)）至背根節(jié)經(jīng)脊髓人腦而致病。[病因?qū)W]狂犬病病毒是負鏈RNA病毒，屬彈狀病毒科的彈狀病毒屬。該病毒編碼兩種主要蛋白，一種為G蛋白，它是病毒包膜外突起的基本單位，誘導(dǎo)產(chǎn)生中和抗體；另一種為病毒顆粒內(nèi)部的N蛋白，誘導(dǎo)補體結(jié)合抗體、熒光抗體等，根據(jù)狂犬病病毒N、G基因的遺傳差異，狂犬病病毒可分為6種基因型，其中1～4...
在多年的蛋白芯片技術(shù)的研究過程中，研究者為了尋找合適的物質(zhì)作為蛋白的載體進行了不懈的探索。例如日本學(xué)者利用含有陽離子表面活性劑（HTAB）脂質(zhì)體作為載體，通過戊二醛作用使其與一種鐵蛋白包裹外殼的成分結(jié)合組裝制備成一種納米水平的裝配體，這種裝配體可以在適當(dāng)?shù)膒H條件下使鐵蛋白分子進入并固定于包裹外殼內(nèi)面，形成蛋白質(zhì)的載體。有人利用某些固體表面或覆蓋上含有電解質(zhì)的薄膜作為載體，可以將膠體蛋白質(zhì)顆粒成分轉(zhuǎn)移至薄膜上形成蛋白芯片。Uetz等在分析啤酒酵母基因組序列全長度閱讀框架編碼各...
Ge在蛋白質(zhì)的相互作用的研究中，采用了一種通用的蛋白質(zhì)芯片系統(tǒng)，該系統(tǒng)敏感有效，用途廣泛，可定量測定及重復(fù)使用，而且操作簡易。Gavin等應(yīng)用蛋白芯片技術(shù)觀察代謝過程有關(guān)作用物和酶的相互作用關(guān)系。他們選擇3對蛋白激酶與作用物系統(tǒng)，即依賴3，，5，—磷酸蛋白激酶—Kemptide；酪蛋白激酶Ⅱ—蛋白質(zhì)磷酸酶抑制因子2和p42促有絲分裂劑激活蛋白（MAP）激酶（ErK2）—ElKl，首先將各系統(tǒng)的作用物按順序固定于3張BSA-NHS玻片上，分別在有核素7-s’PATP的環(huán)境中與不...
病毒分離是診斷NDzui為確切的一種方法，并且可以為感染的毒株定性。通常采用雞胚接種的方法分離NDV，也可用鴨胚、鵪鶉胚或雞胚成纖維細胞等。病毒分離時取患病雞的腦、脾、肺等組織的勻漿混合物，加抗生素處理后，接種于雞胚或其他禽類胚的尿囊腔或雞胚成纖維細胞中。組織樣品須反復(fù)凍融3次以上，以確保病毒分離的成功。病料接種雞胚后，一般培養(yǎng)36～96h雞胚發(fā)生死亡，可見胚體的頭、翅、頸、胸等處出血，尿囊液清朗，內(nèi)含大量病毒，呈現(xiàn)較高的血凝性。分離病毒時還應(yīng)結(jié)合相應(yīng)的血凝和血凝抑制試驗等方...
單克隆抗體僅僅識別一個抗原位點，用抗病毒蛋白的單克隆抗體就可以檢測出各種病毒毒株表面抗原之間的微小差異，從而通過抗原差異來研究病毒的變異并可對其分群歸類。20世紀(jì)80年代以來，國內(nèi)外很多實驗室已制備出多株NDV單克隆抗體，并用其測知NDV有很多變種。Russell等在1983年zui早以Ulster2C弱毒株為抗原研制出針對新城疫病毒不同多肽成分的9株單克隆抗體，將新城疫病毒的毒株分為A—H8個群，同一群中的病毒與這些單抗的反應(yīng)譜相同，大多數(shù)具有共同的生物學(xué)和流行病學(xué)特征。隨...
當(dāng)前位置：
